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              HE染色提高染色效果的技巧分享
              來源: 時(shí)間:2024-09-10 11:12:45 瀏覽:1897次

              HE染色提高染色效果的技巧分享

               

              HE染色(蘇木精-伊紅染色)是一種常用的組織學(xué)染色方法,廣泛應(yīng)用于病理學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域。提高HE染色效果,對(duì)于病理診斷和科學(xué)研究具有重要意義。

              一、準(zhǔn)備工作

              1. 組織固定:固定是染色成功的關(guān)鍵。使用10%中性甲醛溶液固定組織,固定時(shí)間一般為24小時(shí)。固定時(shí)間不宜過長或過短,以確保組織結(jié)構(gòu)完整。

              2. 脫水:脫水過程要徹底,避免組織內(nèi)殘留水分影響染色效果建議使用梯度酒精(70%80%90%95%100%)進(jìn)行脫水。

              3. 透明:使用二甲苯進(jìn)行透明處理,透明時(shí)間不宜過長,以免組織過于脆弱。

              4. 浸蠟:選用熔點(diǎn)適宜的石蠟進(jìn)行浸蠟,保證組織完全浸蠟。

              二、切片制作

              1. 切片厚度:切片厚度以4-6μm為宜,過厚或過薄都會(huì)影響染色效果。

              2. 切片展平:切片在水中展平,避免皺褶和折疊。

              3. 切片粘貼:使用粘附性較好的載玻片,確保切片牢固粘貼。

              三、染色技巧

              1. 蘇木精染色:

              1)充分氧化:蘇木精染液在使用前需充分氧化,使染液呈紫紅色。

              2)控制染色時(shí)間:染色時(shí)間根據(jù)組織類型和細(xì)胞成分進(jìn)行調(diào)整。一般染色時(shí)間為5-10分鐘,時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞核過度染色,時(shí)間過短則染色不充分。

              3)分化:使用1%鹽酸酒精進(jìn)行分化,分化時(shí)間不宜過長,以免細(xì)胞核褪色。

              2. 伊紅染色:

              1)選用合適濃度的伊紅染液:一般使用1%的伊紅染液,濃度過高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)染色過深,過低則染色不充分。

              2)控制染色時(shí)間:伊紅染色時(shí)間一般為1-3分鐘,根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整。

              四、脫水、透明、封片

              1. 脫水:使用梯度酒精(95%100%)進(jìn)行脫水,每個(gè)梯度酒精浸泡2-3次,每次1-2分鐘。

              2. 透明:使用二甲苯進(jìn)行透明處理,透明時(shí)間不宜過長,以免組織過于脆弱。

              3. 封片:選用中性樹膠或加拿大樹脂進(jìn)行封片,封片時(shí)避免氣泡產(chǎn)生。

              五、注意事項(xiàng)

              1. 染液配制:嚴(yán)格按照配方配制染液,確保染液質(zhì)量。

              2. 染液更新:定期更換染液,避免染液老化影響染色效果。

              3. 室溫控制:染色過程中,保持室溫在18-25℃,避免溫度波動(dòng)影響染色效果。

              4. 避光操作:在染色過程中,盡量避免強(qiáng)光照射,以免染料分解。

              5. 清潔儀器:確保染色缸、載玻片等儀器清潔,避免雜質(zhì)影響染色效果。

              六、常見問題及解決方法

              1. 細(xì)胞核染色過深:適當(dāng)縮短蘇木精染色時(shí)間,加強(qiáng)分化。

              2. 細(xì)胞質(zhì)染色過深:適當(dāng)縮短伊紅染色時(shí)間,降低伊紅染液濃度。

              3. 染色不均勻:檢查切片展平情況,確保切片均勻接觸染液。

              4. 組織脫落:檢查切片粘貼情況,確保切片牢固粘貼。

               

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              文字是人類用符號(hào)記錄表達(dá)信息以傳之久遠(yuǎn)的方式和工具。現(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達(dá)的方式和思維不同。文字使人類進(jìn)入有歷史記錄的文明社會(huì)。
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