預(yù)存
                
                

                                
                
                            
              
        
              
        
              
            
              
                
            
              


            
              
                
              
                    
              
                        
                    
              
                
              
            
              

        
              
    
              













    
    
    
    Document
    
    



    
              當前位置：文庫百科 ? 文章詳情
              
    
              
        
              

            
              
                
              
                    
              實時熒光定量PCR（qPCR）的實驗步驟解析
              
                    
              
                        來源：
                        時間：2022-12-29 09:33:40
                        瀏覽：8303次
                    
              
                    
              

                    

                
              
                
              qPCR: Quantitative Real-time PCR,中文名是實時熒光定量PCR。qPCR是一種在DNA擴增反應(yīng)中，以熒光化學物質(zhì)測每次聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過內(nèi)參對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。
              TakaRa 試劑盒PrimeScript? RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)，SYBRGreenⅠ法。
              實驗步驟：
              一，去除基因組DNA反應(yīng)：
              全波長酶標儀測出RNA濃度（單位ng/ul）;按照以下劑量配制10ul體系
              試劑使用量
              5×gDNA Eraser Buffer2 μl
              Buffer 2.0 μl gDNA Eraser1 ul
              Total RNA1ug/RNA濃度
              RNase Free dH2OUp to10 ul
              PCR程序：42℃ 2min
              4℃ ∞
              二，反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)：
              按照以下劑量配制20ul體系：
              試劑使用量
              步驟 1 的反應(yīng)液10 ul
              PrimeScript RT Enzyme Mix I1 ul
              RT Primer Mi1 ul
              5×PrimeScript Buffer 2（for Real Time）4 ul
              RNase Free dH2O4 ul
              Total20 ul
              PCR程序：37℃ 15min
              85℃ 5s
              4℃ ∞
              三，Real Time PCR
              按照以下劑量配制20ul體系：
              試劑使用量
              SYBR@ Premix Ex TaqII(2X）10 ul
              F Primer(10uM)0.8 ul
              R Primer(10uM)0.8 ul
              ROX Reference II0.4 ul
              反應(yīng)2的DNA模板2 ul
              ddH2O6 ul
              四，儀器設(shè)置
              儀器使用的是熒光定量PCR儀Q6-96，設(shè)置界面如下圖：
              測試狗文庫百科
                              
                
                
                
              
                    
              
                        
              評論 / 文明上網(wǎng)理性發(fā)言
              
                        
              12條評論
              
                    
              
                    
                    
              
                        
              全部評論 / 我的評論
                        
              
                        
              最熱 /  最新
              
                    
              
                    
              
                    
              
                        
              
                        
              
                            
              
                                全部
                                3小時前
                                四川
                            
              
                            
              
                                文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具。現(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字，很多小語種，有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
                            
              
                            
              
                                
              
                                    點贊12
                                
              
                                
              回復
              
                                
              全部
              
                            
              
                        
              
                    
              
                    
              
                        查看更多評論
                    
              
                
              
                
              
                    
              相關(guān)文章
              
                    
              
                        
              
                                
              基礎(chǔ)理論丨一文了解XPS（概念、定性定量分析、分析方法、譜線結(jié)構(gòu)）
              
                                
              2020-05-03
              
                            
              
                                
              晶體結(jié)構(gòu)可視化軟件 VESTA使用教程（下篇）
              
                                
              2021-01-22
              
                            
              
                                
              手把手教你用ChemDraw 畫化學結(jié)構(gòu)式：基礎(chǔ)篇
              
                                
              2021-06-19
              
                            
              
                                
              【科研干貨】電化學表征：循環(huán)伏安法詳解（上）
              
                                
              2019-10-25
              
                            
              
                                
              【科研干貨】電化學表征：循環(huán)伏安法詳解（下）
              
                                
              2019-10-25
              
                            
              
                                
              Zeta電位的基本理論、測試方法和應(yīng)用
              
                                
              2020-08-24
              
                            
              
                    
              
                
              
            
              


        
              
        
              
            
              
                    
              
                        
              項目推薦/Project
              
                        
                    
              

                    
              
                        
              
                                實時熒光定量PCR
                                
              實時熒光定量PCR
              
                            
                                  
              
                
                          
              
                
              
                    
              熱門文章/popular
              
                
              
                
              
                    
                    
              
                            
                            
              基礎(chǔ)理論丨一文了解XPS（概念、定性定量分析、分析方法、譜線結(jié)構(gòu)）
              

                        
              
                            
                            
              晶體結(jié)構(gòu)可視化軟件 VESTA使用教程（下篇）
              

                        
              
                            
                            
              手把手教你用ChemDraw 畫化學結(jié)構(gòu)式：基礎(chǔ)篇
              

                        
              
                            
                            
              【科研干貨】電化學表征：循環(huán)伏安法詳解（上）
              

                        
              
                            
                            
              【科研干貨】電化學表征：循環(huán)伏安法詳解（下）
              

                        
              
                            
                            
              電化學實驗基礎(chǔ)之電化學工作站篇 （二）三電極和兩電極體系的搭建 和測試
              

                        
              

                
              
            
              
        
              
    
              
    
              
        
              
            
              
        
              
        微信掃碼分享文章
    
              







    
    
    
    
    



    


中文字幕在线亚洲精品
|
国产成人亚洲精品无码AV大片|
亚洲国产成人片在线观看无码|
国产精品亚洲精品日韩动图|
亚洲精品色播一区二区|
亚洲 欧洲 视频 伦小说|
亚洲成人福利网站|
亚洲精品视频免费在线观看|
亚洲丝袜美腿视频|
亚洲最大福利视频网站|
无码欧精品亚洲日韩一区|
亚洲欧洲无码AV电影在线观看|
亚洲中文字幕无码久久精品1|
国产精品V亚洲精品V日韩精品|
国产精品亚洲综合一区|
久久久久亚洲AV无码专区网站|
久99精品视频在线观看婷亚洲片国产一区一级在线
|
亚洲av最新在线网址|
亚洲成a人片在线观看日本|
亚洲av一综合av一区|
亚洲电影一区二区三区|
亚洲伊人tv综合网色|
亚洲精品在线电影|
亚洲人成图片网站|
亚洲丰满熟女一区二区哦|
国产亚洲福利精品一区二区|
亚洲男女内射在线播放|
亚洲人JIZZ日本人|
亚洲AV人无码综合在线观看|
亚洲高清不卡视频|
亚洲综合丁香婷婷六月香|
亚洲欧美日韩自偷自拍|
国产亚洲人成在线影院|
久久久久一级精品亚洲国产成人综合AV区
|
久久久亚洲欧洲日产国码aⅴ|
亚洲精品日韩专区silk|
亚洲午夜在线播放|
国产成人精品久久亚洲高清不卡|
亚洲国产成人久久综合区|
亚洲国产另类久久久精品小说|
亚洲天天做日日做天天欢毛片|