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    熒光定量PCR的優點和檢測方法盤點
    來源:測試GO 時間:2022-11-03 11:37:47 瀏覽:3648次

     熒光定量PCR檢測以下優點

    1.高靈敏性:可檢測單個細胞基因;

    2.高特異性和精確性:將DNA雜交的高特異性和光譜技術的高精準性融合,應用熒光探針和光電傳導,直接探測基因擴增過程中熒光信號的變化,以獲得定量結果,相當于在PCR反應過程中自動完成了Northern雜交;

    3.操作簡便、速度快:通過計算機和分析軟件實現PCR擴增、產物檢測和定量分析一體化;

    4.安全、無污染:FQ-PCR在全封閉狀態下進行PCR擴增和產物分析,杜絕了傳統PCR開放檢測對環境的污染和由此導致的假陽性;

    5.結果觀測重復性好:一起在線實時觀測,結果判斷直觀,避免人為因素干擾。

     內參基因ACTIN(溶解曲線)

    熒光定量PCR檢測的兩種方法

    1.SYBR GreenⅠ法

    PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。

    2.TaqMan探針法:

    探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物的形成完全同步。


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    12條評論
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    全部 3小時前 四川
    文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具。現代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
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