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              穩(wěn)態(tài)瞬態(tài)熒光光譜 (PL)
              來源:鑠思百材料分析檢測 時間:2022-10-11 14:13:26 瀏覽:7749次

              1.什么是熒光

              物體經(jīng)過較短波長的光照,把能量儲存起來,然后緩慢發(fā)出較長波長的光,發(fā)出的這種光就叫熒光。

              2.什么是熒光光譜

              任何熒光化合物都具有兩個特征光譜:激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。激發(fā)光譜反映了某一固定的發(fā)射波長下所測量的熒光強度對激發(fā)波長的依賴關系;發(fā)射光譜反映了某一固定激發(fā)波長下所測量的熒光的波長分布。

              圖為:室溫下菲的乙醇溶液的激發(fā)光譜和熒(磷)光光譜

              熒光光譜能夠提供激發(fā)譜、發(fā)射譜、峰位、峰強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振度等信息,熒光分析定性和定量的基礎。

              3.什么是熒光壽命?

              熒光物質(zhì)具有兩個重要的發(fā)光參數(shù):熒光壽命和熒光量子產(chǎn)率。熒光壽命(τ)是指當激發(fā)停止后,分子的熒光強度降到激發(fā)時最大強度的1/e所需的時間,它表示粒子在激發(fā)態(tài)存在的平均時間,通常稱為激發(fā)態(tài)的熒光壽命。與穩(wěn)態(tài)熒光提供一個平均信號不同,熒光壽命提供的是激發(fā)態(tài)分子的信息,前者可以告訴你事情發(fā)生了,而后者可以告訴你為什么發(fā)生。

              熒光壽命與物質(zhì)所處微環(huán)境的極性、黏度等有關,可以通過熒光壽命分析直接了解所研究體系發(fā)生的變化。熒光現(xiàn)象多發(fā)生在納秒級,這正好是分子運動所發(fā)生的的時間尺度,因此利用熒光技術可以“看”到許多復雜的分子間作用過程,例如超分子體系中分子間的簇集、固液界面上吸附態(tài)高分子的構象重排、蛋白質(zhì)高級結構的變化等。

              4.什么是熒光量子產(chǎn)率?

              熒光量子產(chǎn)率(φf)是熒光物質(zhì)另一個基本參數(shù),它表示物質(zhì)發(fā)生熒光的能力,數(shù)值在0~1之間。熒光量子效率是熒光輻射與其他輻射和非輻射躍遷競爭的結果。

              式中, kf為熒光發(fā)射過程的速率常數(shù), ∑ki為其他有關過程的速率常數(shù)總和。一般來說, kf主要決定于化學結構,而 ∑ki主要決定于化學環(huán)境,同時也與化學結構有關。

              5.什么是熒光分析?

              熒光分析就是基于物質(zhì)的光致發(fā)光現(xiàn)象而產(chǎn)生的熒光的特性及其強度進行物質(zhì)的定性和定量的分析方法。目前,也廣泛地作為一種表征技術來研究體系的物理、化學性質(zhì)及其變化情況,例如生物大分子構象及性質(zhì)的研究。

              熒光光譜適用于固體粉末、晶體、薄膜、液體等樣品的分析。根據(jù)樣品分別選配石英池(液體樣品)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)。

              熒光光譜分析可與顯微鏡耦合,獲得微區(qū)分析結果。熒光是無損傷、非接觸的分析技術,還可用于自動檢驗、批量篩分、遠程原位分析和活體分析。

              熒光分析的優(yōu)點:

              (1)靈敏度高;

              (2)選擇性強;

              (3)試樣量少、方法簡單;

              (4)提供較多的物理參數(shù)。但是也存在應用范圍不夠廣泛、對環(huán)境敏感(干擾因素多)等缺點。

              6.熒光光譜定性分析依據(jù)?

              不同結構熒光化合物都有特征的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜,因此可以將熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜與發(fā)射光譜的形狀、峰位與標準溶液的光譜圖進行比較,從而達到定性分析的目的。

              7.熒光光譜定量分析原理?

              在低濃度時,溶液的熒光強度與熒光物質(zhì)的濃度成正比:F=Kc。其中,F(xiàn)為熒光強度,c為熒光物質(zhì)濃度,K為比例系數(shù)。這就是熒光光譜定量分析的依據(jù)。

              上述關系不適用于熒光物質(zhì)濃度過高時,熒光物質(zhì)濃度過高,其熒光強度反而降低。原因有:

              (1)內(nèi)濾效應。一是,當溶液濃度過高時,溶液中雜質(zhì)對入射光的吸收作用增大,相當于降低了激發(fā)光的強度。二是,濃度過高時,入射光被液池前部的熒光物質(zhì)強烈吸收,處于液池中、后部的熒光物質(zhì),則因受到入射光大大減弱而使熒光強度大大降低;而儀器的探測窗口通常對準液池中部,從而導致檢測到的熒光強度大大降低。

              (2)相互作用。較高濃度溶液中,可發(fā)生溶質(zhì)間的相互作用,產(chǎn)生熒光物質(zhì)的激發(fā)態(tài)分子與其基態(tài)分子的二聚物或其他溶質(zhì)分子的復合物,從而導致熒光光譜的改變和/或熒光強度下降。當濃度更大時,甚至會形成熒光物質(zhì)的基態(tài)分子聚集體,導致熒光強度更嚴重下降。

              (3)自淬滅。熒光物質(zhì)的發(fā)射光譜與其吸收光譜呈現(xiàn)重疊,便可能發(fā)生所發(fā)射的熒光被部分再吸收的現(xiàn)象,導致熒光強度下降。溶液濃度增大時會促使再吸收現(xiàn)象加劇。

              當然,熒光強度的影響因素還有溶劑、溫度、pH值、散射光等,在定量分析中需要加以考慮。

              熒光光譜定量分析的計算與其他光譜類似,包括標準曲線法、比例法等。

              8.熒光光譜的應用領域?

              熒光光譜已應用于很多不同領域,特別是需要無損、顯微、化學分析、成像分析的場合。無論是需要定性還是定量的數(shù)據(jù),熒光分析都能快速、簡便地提供重要信息。

              來源:鑠思百材料分析檢測

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              全部 3小時前 四川
              文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具。現(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
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