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    TEM測試如何低速離心取材以及送樣方法?
    來源:測試GO 時間:2022-09-16 14:51:47 瀏覽:2118次

    在我們進行TEM測試時,低速離心取材以及送樣是實驗的重要的一部分,下面教大家一個所有類型均適用的細胞樣品操作方法:

    動物組織的TEM圖

    1. 最好刮取細胞,收集在離心管中,1500 rpm離心5 ~ 10 min(初次離心參數可按自己的經驗調整,目的是不損傷細胞結構的情況下去掉培養液成分)。

    2. 棄上清,加入常溫(平時固定液4℃保存,臨用前拿出復溫到室溫或體溫)的3%戊二醛固定液,重懸細胞。常溫固定2 min

    3. 轉移至1.5 ml尖底EP管,2000 rpm離心10 min。此步離心后,細胞應為約半顆綠豆大小。

    4. 用吸管小心棄上清,加入室溫的0.1M PB或等滲PBS,重懸細胞。再以1000 rpm離心5 ~10 min

    5. 以相同條件重復上述重懸、離心步驟,再次漂洗細胞(不要偷懶,要洗第二遍)。

    6. 用吸管小心棄上清,加入預熱到40℃GT2(實驗室提供的特殊固定液)專用溶液重懸細胞(輕輕搖勻或吹吸均可,不要有肉眼可見的大塊);立即以3000 rpm離心10 min

    7. 用吸管盡快小心棄上清;然后密閉管蓋,轉入4℃靜置10 min(嚴禁結冰)。

    8. 沿管壁緩慢加入固定液,不要沖擊細胞團,靜置30 min后可送樣。

    重點:

    1)固定和各項操作都是室溫條件,GT2(實驗室提供的特殊固定液)本身要預熱到40℃GT2凝結前沒有需要預冷的步驟。

    2)取材完成后,在4℃保存,保存和運輸期間嚴禁結冰(太靠近冰箱后壁或冰袋運輸都可能使樣品結冰。冬季寧可常溫送樣)。

    3)觀察細胞連接的實驗,嚴禁用消化的方法收集細胞。


    測試狗

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    12條評論
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    全部 3小時前 四川
    文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具。現代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
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